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Risultati chiave e valore in sintesi Comprendere come le proteine intrinsecamente disordinate interagiscono con le membrane biologiche è una sfida di lunga data in biofisica. In un recente studio pubblicato su Chimica biofisica (2026, 329:107550), Dott. Yann Fichou e il suo team presso Università di Bordeaux, Francia , ha sviluppato un robusto spettroscopia EPR quantitativa metodo per misurare direttamente Interazioni proteina-lipidi Tau Il loro approccio non si basa su sonde indirette o segnali di fluorescenza relativi, consentendo una quantificazione precisa e assoluta delle popolazioni proteiche libere e legate alla membrana. Utilizzando il Spettrometro EPR a banda X da banco CIQTEK EPR200M , il team ha risolto quantitativamente il comportamento di legame di proteina tau a membrane lipidiche caricate negativamente, ha estratto concentrazioni assolute di popolazioni proteiche libere e legate e ha determinato l'affinità di legame con un input sperimentale minimo. Questo lavoro non solo rivela intuizioni meccanicistiche chiave sulle interazioni Tau-membrana, ma dimostra anche la potenza di CW EPR per l'analisi quantitativa nei sistemi biologici complessi. Contesto: perché quantificare le interazioni proteina-lipide è così difficile Le interazioni proteina-lipidi svolgono un ruolo centrale nella segnalazione cellulare, nell'organizzazione delle membrane e nell'aggregazione di proteine patologiche. Nelle malattie neurodegenerative come il morbo di Alzheimer, si ritiene che l'interazione tra la proteina Tau e le membrane cellulari sia un evento precoce critico che innesca l'aggregazione patologica. Nonostante la sua importanza, la caratterizzazione quantitativa di queste interazioni rimane impegnativa. Le membrane biologiche sono eterogenee, dinamiche e altamente sensibili alle condizioni sperimentali. Le interazioni stesse sono spesso deboli, transitorie e coinvolgono molteplici stati conformazionali. Metodi convenzionali come la fluorescenza o i saggi colorimetrici forniscono tipicamente segnali relativi e richiedono curve di calibrazione che introducono ulteriore incertezza. Spettroscopia EPR offre un approccio fondamentalmente diverso. Sondando direttamente la dinamica delle molecole marcate con spin, EPR quantitativa fornisce una finestra sensibile e accurata sul movimento molecolare, sul legame e sulla restrizione conformazionale, consentendo una determinazione precisa delle interazioni proteina-lipide. Dalle forme delle linee spettrali alla dinamica del legame molecolare La tau è una proteina intrinsecamente disordinata e la sua interazione con le membrane lipidiche comporta sottili cambiamenti nella mobilità molecolare piuttosto che grandi riarrangiamenti strutturali. Questo rende CW EPR particolarmente adatto al problema. La proteina Tau è stata marcata in modo specifico per ogni sito utilizzando l'etichettatura di spin sito-diretta (SDSL). Gli spettri EPR ad onda continua sono stati acquisiti su CIQTEK EPR200M a temperatura ambiente e 150 ...